Introduction

Le but de ces tests est de confirmer la présence de cristaux, préalablement identifiés en microscopie. Ces tests sont utilisés uniquement lorsque l’identification est cliniquement utile.

Certaines confirmations peuvent se faire facilement à partir de réactifs utilisés en routine (acide urique, cholestérol, phosphates, calcium ...). Certains tests demandent d’avoir sous la main des réactifs qui ne sont pas utilisés à d’autres fins.

Pour être certain que la réaction est due aux cristaux, il est préférable d’exécuter sur chaque spécimen, deux tests. Le premier est fait à partir d’un petit volume du surnageant obtenu en centrifugeant le culot. Le deuxième test est fait à partir d’un volume égal de sédiment dispersé. La différence entre les deux tests est due à de la matière centrifugeable donc solide. Naturellement, les cristalluries mixtes peuvent être un inconvénient. Une bonne stratégie devrait venir à bout de ces difficultés.

Comme les volumes de culot sont restreints il est nécessaire d’avoir une bonne idée de l’identité des cristaux. Avant de se lancer dans un test de confirmation sur des cristaux rares, il faut écarter les possibilités de formes particulières des cristaux banals.

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Cystine

Réactifs

Ammoniaque 10%

17 ml d’ammoniaque concentrée dans 100 ml H2O

Cyanure de sodium 5%

5 g de cyanure de sodium dans 100 ml H2O+ 200 ul NH4OH 28%

Nitroprusside de sodium 5%

0,5 g de nitroferricyanure de sodium dans 10 ml H2O stable seulement 1 sem. à 4°C

Procédure

1. Trois gouttes de sédiment
2. Une goutte d’ammoniaque 5%
3. Une goutte de cyanure de sodium 5%. Attendre 5 minutes
4. Deux gouttes de nitroprusside 5%
5. Lire immédiatement ( positif = couleur rouge pourpre )

NB Ces réactifs sont normalement disponibles dans les trousses pour l’analyse des calculs.

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Hémosidérine

L’hémosidérine peut être démontrée par la réaction de Roux (Bleu de Prusse). Cette coloration agit sur les dépôts de fer que l’on peut retrouver: libres, dans les macrophages, dans les cellules tubulaires et dans les cylindres.

Réactifs

Ferricyanure de potassium 2%

2 g de ferricyanure de potassium dans 100 ml H2O

HCl 1%

5 ml d’HCl concentrée dans 500 ml H2O

Réactif de travail

mélanger ( 5:5) le Ferricyanure de potassium 2% et l’ HCl 1%
préparer juste avant usage

Procédure

1. Trois gouttes de sédiment
2. Un ml de réactif de travail. Mélanger
3. Attendre 10 minutes
4. Une couleur bleu indique la présence de fer
5. Centrifuger le mélange
6. Rechercher en microscopie les dépôts bleus.
7.  

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Sulfamide

Réactifs

Procédure HCl 10%

50 ml d’HCl concentrée dans 500 ml H2O

Nitrite de sodium 0,1%

0,1 g de nitrite de sodium dans 100 ml H2Ostable 2 semaines au frigo.

Sulfamate d’ammonium 0,5%

0,5 g de sulfamate de sodium dans 100 ml H2O

Réactif pour diazo 0,1%

0,1 g de N(1-naphtyl éthylène-diamine di-HCl)dans 100 ml H2O

Procédure

1. Trois gouttes de sédiment
2. Deux gouttes d’HCl 10%. Attendre 5 secondes
3. Deux gouttes de nitrite de sodium 0,1%. Attendre 60 secondes
4. Deux gouttes de Sulfamate d’ammonium 0,5%
5. Deux gouttes de Réactif pour diazo 0,1%
6. Lire immédiatement ( positif = couleur magenta )

NB. Des réactifs semblables peuvent être récupérés à partir des kits de dosage de LAP

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